薄层色谱TLC通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀地铺成薄层,试样点在薄层的一端,流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。
薄层色谱TLC的常规使用步骤如下:
1.将薄层色谱TLC板切成方形。良好的尺寸是7厘米x 7厘米,但请确保它首先适合您的溶剂容器。
2.将用于色谱柱的溶剂倒入玻璃容器中。溶剂应该是2-3毫米深,这样斑点不会浸没,确保了样品不会溶解到溶剂中并随着溶剂向上移动到TLC板上。
3.使用毛细管将样品“点”到左下角的板上。该点应距离底部和左侧边缘约0.5-1厘米,直径1-2毫米。
4.将薄层色谱TLC板放在容器中。不要移动或打扰板或TLC容器,因为这会导致溶剂中的波纹和溶剂的不规则。当溶剂前端距离板顶部0.5-1 cm时,用镊子小心地从容器中取出板。
5.让溶剂蒸发。将板旋转90°,使原始样品点位于右下角。组分斑点将沿着板的底部形成水平线。
6.将TLC板放回容器中。当溶剂前端距离板顶部0.5-1 cm时,用镊子小心地从容器中取出板。
7.让板上的溶剂蒸发,然后使用UV灯或高锰酸钾浸渍使板可视化。
8.用铅笔标记所有斑点的位置。从样品被点样的角落,通过样品点,到对面的角落画一条对角线。在二氧化硅上稳定的化合物将出现在对角线上。如果化合物在二氧化硅上分解,其斑点将低于对角线。