薄层色谱TLC的定性检测方法

 

薄层色谱TLC的定性检测：

展开完毕后，把薄层从层析缸中取出，用铅笔划出或小针刺出展开剂前缘的位置，随即进行显色，以确定各个斑点的位置、Rf值和显色的情况，从而判断试样中含有哪些组分。有色物质经展开后呈现明显的色斑，很易判断。对于无色物质，可根据化合物的性质，用物理检出法、化学检出法、酶与生物检出法和放射性检出法进行显色。

1）物理检出法：紫外光、碘、水

 

2）化学检出法：化学检出法是在薄层上使用一种或数种化学试剂与被检出物质反应，生成有颜色的化合物而定位。这种试剂叫显色剂。

显色剂一般分为两类，即通用显色剂和专属性显色剂

(1)通用显色剂：

a.浓硫酸或50%的硫酸溶液：极大多数有机物质，喷此种显色剂后立刻或在加热到110—120℃并经数分钟后出现棕色到黑色斑点。

b.酸碱指示剂溶液：例如0.3%溴甲酚绿甲醇溶液，在绿色背景上显现黄色斑，表示是脂肪族羧酸。常用的通用显色剂还有：5%磷钼酸乙醇、碱性高锰酸钾溶液、硝酸银-氢氧化铵试剂、荧光显色剂等。

(2)专属性显色剂，指能使某一类或少数几类官能团或化合物显色的试剂。

 

3）原位化学衍生化

 

4）生物与酶检出法

 

5）放射显影法