黄曲霉毒素亲和柱测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品中的黄曲霉毒素B1经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉毒素B1免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素B1,然后注入到分析仪器中用于检测。
黄曲霉毒素亲和柱的用途
免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素,从而对样品起到非常针对性的净化作用,过柱净化后的样品液可直接用于 HPLC 分析或处理后用荧光光度计检测。
亲和柱与 HPLC 或荧光光度计配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
黄曲霉毒素亲和柱的使用注意事项
● 使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25℃)。
● 亲和柱2~8℃储存,不得冻存。
● 不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
● 取样量:根据需要可以适当增加或减少取样量,注意提取液量要相应改变。
● 柱容量:300ng,当样本中待检毒素的含量除以稀释倍数高于柱容量时,需要适当降低上样液的体积,重新检测。
● PH:亲和柱的上样溶液pH需在6~8之间,若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
● 上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
● 黄曲霉毒素B1可致癌,应戴手套口罩等防护工具操作。
● 使用过的容器及黄曲霉毒素B1溶液用次氯酸钠溶液(5%V/V)浸泡过夜。