动物性食品中金刚烷胺残留量的测定 GB31660.5-2019

金刚烷胺

金刚烷胺早是用于抑制A型流感病毒的药物。在20世纪90年代末，曾用于动物病毒的预防和治疗。但长期使用金刚烷胺会使动物体内产生一定的毒性，这些毒素终会累积在人体内，从而危害人的身体健康。金刚烷胺在动物性食品中残留量的检测也是今年国家食品安全监督抽检中的一个重要检测项目。

安谱实验根据2019年新国标GB31660.5-2019《动物性食品中金刚烷胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，使用CNW PSA SPE小柱进行实验，此方法耗材简单易得，回收率高，重现性好。

一、样品前处理

1.猪肉基质： 

称取均质处理的猪肉样品2g于50mL离心管中，加入 D15-金刚烷胺内标溶液（加标浓度20ppb，猪肉基质空白样品则不需要加标），加1%乙酸乙腈溶液10mL，漩涡2min，3000 r/min离心5min，上清液转入另一50mL离心管中，重复提取一次，合并两次上清液。在合并的上清液中加无水硫酸钠3g、正己烷10mL，涡旋1min，3000r/min离心5min，弃去正己烷层，剩余溶液转至100mL鸡心瓶中，40℃水浴下旋转蒸干，用1.0 mL甲醇溶解残渣。

2.鸡肝基质：

称取均质处理的鸡肝样品2g于50mL离心管中，加入 D15-金刚烷胺内标溶液（加标浓度20ppb，鸡肝基质空白则不需要加内标），加1%乙酸乙腈溶液10mL，漩涡2min，3000r/min 离心5min，上清液转入另一50mL 离心管中，重复提取一次，合并两次上清液。在合并的上清液中加无水硫酸钠3g、正己烷10mL，涡旋1min，3000r/min离心5min，弃去正己烷层，剩余溶液转至100mL鸡心瓶中，40℃水浴下旋转蒸干，用1.0mL甲醇溶解残渣。

二、小柱操作

SBEQ-CA2450  CNWBOND PSA 乙二胺基-N-丙基 SPE小柱 50mg， 1mL/100 pcs

净化：将溶解液直接匀速通过小柱，呈滴状流入试管中。

浓缩：量取滤液0.5 mL于离心管中，40℃氮气吹干，加入50%乙腈水溶液0.5 mL，涡旋30s，10000 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm针式滤器供上机测定

三、LCMS/MS测定条件

液相条件: 

色谱柱：Athena C18（2.1*50mm，1.8um）

流速：0.2 mL/min

柱温：40℃

进样量：1ul

流动相:  A: 0.1%甲酸水   B: 甲醇  

质谱参数:  

离子源：ESI

采集模式：正模式

扫描方式：MRM      

离子源温度：300℃

电压：4000V

金刚烷胺离子对：152_135（定性定量） 152_93（定性）

盐酸金刚烷胺-D15离子对：167_150（定性定量）

四、实验谱图

1.金刚烷胺标品图谱20ppb

2.猪肉基质加标谱图（20ppb）

3.猪肉基质空白谱图

4.鸡肝基质加标20ppb

 5.鸡肝基质空白

五、实验数据

采用基质配标标准溶液配制标准曲线，本次实验猪肉基质空白中检出金刚烷胺1.1ug/kg，鸡肝基质空白中检出金刚烷胺0.3ug/kg 。

六、实验耗材