果聚糖是由果糖聚合而成的线型或分支型的多糖总称。果聚糖是一类有利于人体健康的碳水化合物,进入结肠后可以成为肠胃菌的营养物质。GB5009.255—2016《食品安全国家标准食品中果聚糖的测定》规定了食品中果聚糖含量的离子色谱法测定方法,适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品、婴幼儿谷类辅助食品、固体饮料、配制酒中单独添加的低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的测定。
果聚糖的测定过程中您是否遇到过困难?
蔗糖酶,果聚糖酶的选择和使用您是否有过疑问?
参照方法,聚焦产品,
安谱实验带您一起解读
果聚糖测定过程中的那些事儿!
实验原理
试样经热水浸提,样液中的蔗糖经蔗糖酶水解成葡萄糖和果糖,葡萄糖和果糖经硼氢hua钠还原成相应的糖醇,多余的硼氢hua钠用乙酸中和。样液中的果聚糖经过果聚糖酶水解成果糖和葡萄糖,经离子色谱-脉冲安培检测器测定果糖含量,通过换算系数,折算得到果聚糖的含量。
实验过程
检测条件(参考GB5009.255—2016中仪器参考条件2)
实验谱图
▲图一:果糖标准溶液色谱图(16mg/L)
▲图二:果糖标准曲线图
▲图三:彩面样品色谱图
实验结果
1.彩面中的果聚糖含量
2.质控样及标准品回测结果
产品信息
小贴士
如何根据实验方法选择适用的酶并进行配置?(GB5009.255-2016方法中用到两种酶,蔗糖酶和果聚糖酶)
一、若所选酶和方法一致,则可直接按照方法进行实验。如GB5009.255-2016中蔗糖酶,方法中具体要求如下:
3.1.3 蔗糖酶:来源于酵母,酶活力≥300U。
3.2.3 蔗糖酶溶液(4.5U/mL):将蔗糖酶(活力为300U)溶解于66mL马来酸钠缓冲溶液,分装到2mL的离心管中,-20℃保存,可放置6个月。使用前需测定酶活力。
安谱实验提供的蔗糖酶:CFHN-E-SUCR,蔗糖酶 300 Units,和方法要求的酶活一致,可按照方法3.2.3直接进行稀释实验。
二、若所选酶和方法不一致,则需要根据方法中所用酶活进行换算后实验。如GB5009.255-2016中果聚糖酶,方法中具体要求如下:
3.1.7 果聚糖酶:来源于黑曲霉,酶活力≥10000U。
3.2.9 果聚糖酶溶液(455U/mL):将果聚糖酶(活力为10000U)溶解于22mL乙酸钠缓冲溶液,分装到2mL的离心管中,-20℃保存,可放置6个月。使用前需测定酶活力。
安谱实验可提供两种果聚糖酶:
a:一种溶液型:CFHN-E-FRMXLQ-10mL,果聚糖酶混合物,2,000 U/mL
这里的果聚糖酶的浓度是2,000 U/mL,10ml的总酶活是20000U,是方法中总酶活力的2倍。客户在使用过程中,只要保证果聚糖酶溶液的浓度为455U/mL,根据3.2.9方法,可以有两种配置方法。
①可以量取5mL的E-FRMXLQ溶解于22mL乙酸钠缓冲溶液进行分装;
②也可以将全部10mL的E-FRMXLQ溶解于44mL乙酸钠缓冲溶液中进行分装;
b:一种固体型:CFHN-E-FRMXPD,果聚糖酶混合物,20,000 Units
这里的固体型产品以总酶活计,配置过程需保证果聚糖酶溶液的浓度为455U/mL,即将总酶活为20,000 Units的固体果聚糖酶混合物溶解在44mL乙酸钠缓冲溶液中进行分装,注意,这个固体型酶的溶解过程,根据酶的使用说明书,先将该固体果聚糖酶全部溶解在去离子水中,再用相应的缓冲溶液进行稀释。
酶的使用过程中,客户也可以根据需要测试的样品数量,依照所选酶的具体酶活,换算成需要的量。