呕吐毒素亲和柱的测定的基础是抗原抗体反应,脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体连接在柱内凝胶上,样品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇亲和层析柱,在亲和柱内,脱氧雪腐镰刀菌烯醇与抗体结合,之后洗涤亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇,然后注入到分析仪器中用于检测。
呕吐毒素亲和柱的原理:
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、过滤后,缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇亲和柱,在亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇,经氮气吹干复溶后注入到分析仪器中用于检测。
呕吐毒素亲和柱的使用要点:
1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人体有害,应戴手套操作。
2、使用过的玻璃容器及脱氧雪腐镰刀菌烯醇溶液好用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。
3、不要使用过了有效日期的亲和柱。
4、亲和柱不使用时要2-8℃保存,不可冻存。
5、使用前,亲和柱需回至室温(22-25℃)。
6、取样量:根据实际情况可以适当增减,但不可太少,同时提取液体积要按比例随之改变。
7、pH:上柱液pH要在6~8之间,若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节pH。