柱层析填料操作方法的选择和操作规程介绍

　　目前，柱色谱分离的操作方式，主要包括常压分离、减压分离和加压分离3种模式。常压分离是简单的分离模式方便、简单，但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量，但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发，并且有时在柱子外面会有水汽凝结，以及有些易分解的化合物也难以得到，而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。加压分离可以加快淋洗剂的流动速度，缩短样品的洗脱时间，是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗液更快洗脱。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵等。

 

　　柱层析填料操作规程层析柱和凝胶填料是我们实验室的宝贵财富，为了方便大家使用和规范实验室操作，现将使用规范规定如下：

　　1、使用前先明确自己的分离目的，即要做哪一方面的分离，从而选择合适的凝胶填料，请大家务必查阅文献，同时根据自己的分离要求，选择合适长度和直径的层析柱；

 

　　2、选择好层析柱和填料以后，严格按照填料的要求来操作，包括填料的溶胀、脱气、装柱，期间务必严格按照说明书操作；

 

　　3、适当控制上样量，上样以前务必要过0.22µm滤膜；

 

　　4、选择合适的流动相，根据胶的性质决定能否用泵加压；

 

　　5、使用完毕后，请将层析柱做好处理，将层析柱堵好，以防干胶或者进气泡，同时请做好试验纪录，以便下次用时方便查询使用情况；

 

　　6、试验过程中所有用水或者溶液须经过抽滤和脱气，严防气泡。