食品中氯丙醇含量测定的整体解决方案—— GB 5009.191-2024 第一篇

4种氯丙醇及其内标的信息见表1：

表1 目标物信息

氯丙醇混合标准中间溶液（10 μg/mL）：取0.1 mL 1000 ppm 4种氯丙醇混标溶液（货号：CDAA-M-200252-FD-1.2ml），用正己烷溶剂定容至10 mL。于-20 ℃下保存，保存期为 6个月。

氯丙醇混合标准工作溶液（1 μg/mL）：取1 mL 10ppm 4种氯丙醇混标，用正己烷溶剂定容至10mL。临用现配。

氘代氯丙醇混合标准工作液（10 μg/mL）：取1mL 100 ppm 4种氯丙醇内标混标溶液（货号：CDAA-M-200271-FA-1.2ml），正己烷定容至10 mL。得到4种氘代氯丙醇混合标准工作液。于-20 ℃下保存，保存期为 6个月。

按照表2进行标准曲线的配制，临用现配。

表2 氯丙醇标准曲线配制

样品前处理：

基质样品：婴幼儿配方奶粉。

提取：

称取试样4 g（精确到0.01 g）于50 mL塑料离心管中，准确加入混合内标工作液（10.0 μg/mL）20 μL，加入8 mL 20%氯化钠溶液，涡旋1 min后，超声10 min，于4 ℃下以10 000 r/min的转速离心10 min，扎破上层薄膜后小心取出上清液于玻璃试管中，再加入8 mL 20%氯化钠溶液重复提取操作1次，合并上清液，取8 mL待净化。

净化：

将待净化液转移至玻璃硅藻土小柱中，待样品全部浸润于填料中，放置10 min。用10 mL正己烷淋洗，弃去淋洗液，然后用15 mL乙酸乙酯洗脱，玻璃试管收集洗脱液。在洗脱液中加入5 g无水硫酸钠，不断振摇脱水，放置不少于30 min后过滤，转移滤液至密闭性良好的带盖玻璃管中，于40 ℃下氮吹浓缩至0.5 mL（切忌浓缩至干），加入2.00 mL正己烷，涡旋混合，待衍生化。

衍生化：

于标准系列溶液和上述净化液中用气密针快速加入0.05 mL七氟丁酰基咪唑，立即密封，涡旋混合30 s，放置烘箱中，于70 ℃下保温20 min。衍生结束后，取出冷却至室温，加入2 mL 20%氯化钠溶液，涡旋1 min，使水相和正己烷分层，且水相澄清。取上层正己烷相，加入约0.3 g无水硫酸钠吸水干燥，过0.22μm 疏水PTFE滤器，将溶液转移至进样瓶中，供上机测定。

加标样品：

加标水平25 μg/kg（对应上机溶液浓度50ng）：称取样品后，加入氯丙醇混合标准工作溶液（1μg/mL） 0.1mL，后续操作同上；

加标水平200 μg/kg（对应上机溶液浓度400ng）：称取样品后，加入氯丙醇混合标准中间溶液（10μg/mL） 0.08mL，后续操作同上；

前处理注意事项：

1、前处理过程中尽量避免试样塑料耗材，可使用玻璃巴斯德吸管、玻璃移液管、手动进样针等耗材，建议进行方法空白实验监控过程本底情况；

2、硅藻土小柱使用时，待净化液应全部浸没在填料上，而不能穿透，底部最好有少量的填料保持干燥，本实验参照标准要求取8mL提取液进行过柱净化，可满足实验需求，但如仪器灵敏度较好，在满足标准的前提下，建议可以取4mL提取液进行过柱，以保证更好的净化效果；

3、本方法为同位素内标法进行定量，氘代氯丙醇能够对氯丙醇的回收情况进行校正，氯丙醇外标的绝对回收率可能会因为不同基质导致相对较差，如需提高绝对回收率可增加乙酸乙酯的洗脱体积至25mL；

4、七氟丁酰基咪唑易吸水，建议低温干燥保存（可放于含有干燥剂的袋子中然后置于冰箱保存），建议临用前从冰箱拿出；

5、衍生反应需在密闭性良好的带盖玻璃管中进行，建议使用顶空瓶进行；

6、尼龙滤器容易检出本底，建议使用疏水性PTFE针式滤器进行过滤。

气相色谱-质谱联用仪

色谱柱：毛细管气相色谱柱CD-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）

进样量：2 μL

进样口温度：250℃，不分流进样

载气：氦气，

色谱柱流速：1.0 mL/min

升温程序：初始温度50 ℃保持1 min，2 ℃/min升至90 ℃，以20 ℃/min升至300 ℃保持5 min。

传输线温度：280℃    离子源温度：280℃

离子化能量：70 eV     溶剂延迟时间：5 min

扫描模式：选择离子监测SIM模式，离子对信息见表3。

表3 目标物离子对信息

5.1 标准曲线数据

以标准品与内标的质量为横坐标，目标物与其对应内标的峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线。4种氯丙醇化合物的标准曲线和线性相关系数见下表。

表4  3-MCPD、2-MCPD、1,3-DCP、2,3-DCP标准曲线

5.2 加标回收率数据

婴幼儿配方奶粉样品的加标回收率数据见下表。

表5 奶粉基质的加标回收率数据（n=3）

使用安谱实验标准品和相关耗材，参照国标《GB 5009.191-2024 食品安全国家标准 食品中氯丙醇及其脂肪酸乙酯、缩水甘油酯的测定》第一篇，对于婴幼儿配方奶粉样品中1,3-二氯-２-丙醇、2,3-二氯-1-丙醇、2-氯-1,3-丙二醇和3 -氯 -1,2-丙二醇进行检测，加标回收率在80%-110%以上，RSD均小于5%，该方法操作简便稳定。安谱实验标准品和相关耗材能够很好的满足奶粉基质中氯丙醇含量的检测。