咨询电话
15618996369
15618996369
乳铁蛋白是近几年开发研究速度最快的营养添加剂之一，不仅具有广谱抗菌，抗病毒感染作用，还能调节体内铁平衡、调解骨髓细胞的生成等。乳铁蛋白在国内外食品加工中的应用日益广泛，故有关乳铁蛋白的安全生产和使用是需要重点关注的问题。
安谱实验根据《GB 5009.299-2024 食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定》，使用 Poly-Sery 肝素亲和柱（SBEQ-CC65001）对牛奶和奶粉进行样品净化结合高效液相色谱（Athena C4 液相色谱柱，LAEQ-461579）测定乳铁蛋白。实验结果表明 PolySery 肝素亲和柱回收率高，性能稳定，在保证高回收率的同时流速适中，可以显著节约工时和操作时间。
产品特点
✦
•
1、性能优异：柱容量和回收率满足标准要求，性能稳定，平行性优异；
✦
•
2、流速适中：CNW 小柱流速与市面上现有品牌小柱相比，快 1~1.5 倍，在保证回收率效果的同时，能够节约工时和操作时间，节省人力物力；
✦
•
3、适用范围广：适用于牛奶、奶粉类等基质，同时适用于GB 5009.299-2024与NY-T 4439-2023标准方法，能够满足不同检测的需要。
一、样品前处理
溶液配置：
u磷酸盐缓冲液Ⅰ（洗脱液）：
将磷酸盐缓冲包Ⅰ450 mL 纯水溶解，用10 M 氢氧化钠溶液调节pH至 7.5±0.2，定容至 500 mL，转移至洁净密封的试剂瓶中。
磷酸盐缓冲液Ⅱ（提取液）：
将磷酸盐缓冲包Ⅱ用 900mL 纯水溶解，用磷酸溶液调节 pH 至 7.5 ± 0.2，定容至1L，转移至洁净密封的试剂瓶中。
样品提取：
牛奶：
称取 5g 试样于烧杯中，加标后，加入适量磷酸盐缓冲液Ⅱ提取，分次将样品转移至 25 mL 容量瓶，用磷酸盐缓冲液Ⅱ 定容至刻度，充分混匀后转入离心管 5000 r/min 离心 15 min，取样液待净化。
婴儿配方奶粉：
称取 5g 试样于烧杯中，加标后，加入温热 ( 温度不超过 50 ℃ ) 的磷酸盐缓冲液 Ⅱ，搅 拌使样品溶解，冷却至室温，分次将样品转移至 50 mL 离心管中并用磷酸盐缓冲液 Ⅱ 定容至刻度，充分混匀后转入离心管中，取 40 mL 溶液在室温条件下 5000 r/min 离心 15 min，取样液待净化。
柱容量验收：
上样加标 2 mg。
SPE 小柱操作：
肝素亲和柱（SBEQ-CC65001，6 mL/30 pcs）
活化：5 mL 磷酸盐缓冲液Ⅱ；
上样：10 mL 上清液（1 d/2 s）；
淋洗：10 mL 磷酸盐缓冲液Ⅱ，排干；
洗脱：4.5 mL 磷酸盐缓冲液Ⅰ，排干，收集全部洗脱液。磷酸盐缓冲液Ⅰ定容至 5 mL 混合，过 0.22 μm 滤器后，进样，待HPLC/UV 检测。
注意事项：
①上样要注意控制流速，流速过快可能造成10%-15% 左右损失；
② 进样前的针式滤器，推荐采用亲水PVDF滤器、亲水PTFE滤器及水相聚醚砜针式滤器进行过滤，不推荐尼龙针式滤器，可能造成40%-60%的损失。
二、仪器条件
液相色谱：ACQUITY UPLC超高效液相色谱仪
a) 色谱柱：Athena C4液相色谱柱（LAEQ-461579，4.6*150 mm, 5 μm, 300 A, 含柱效液）；
b) 流速：1.0 mL/min
c) 流动相：0.1%三_氟_乙_酸，乙腈梯度洗脱，详情见下表。
表 1-1 梯度洗脱表
三、实验谱图
图 1-1 100 ppb 标准溶液谱图
图 1-2 牛奶样品加标谱图
图 1-3 婴儿配方奶粉样品加标谱图
四、实验数据
表 1-2 水样加标回收率数据
五、实验结论
参照GB 5009.299-2024使用Poly-Sery 肝素亲和柱进行柱容量验证及牛奶基质、婴儿配方奶粉基质乳铁蛋白加标实验，可以看出，肝素亲和柱的柱容量回收率超过 95%，且婴配奶粉基质回收率高于其他国产品牌， RSD 值小于 5%，平行性优异，柱容量满足国标要求。说明 CNW 小柱具有优异的性能。
六、产品推荐
微信公众号
访问手机端