CNW C18柱测定乳及乳制品中三聚氰胺

CNW C18柱测定乳及乳制品中三聚氰胺

a)      三聚氰胺标准品：

标样浓度：5.25ug/ml

峰面积：187.5

b）奶粉样品中三聚氰胺

奶粉样品。

峰面积：98.02

如图所示，采用己烷磺酸钠作为离子对试剂，奶粉中的杂质出峰在三聚氰胺之前，并且分离度较大，*不影响三聚氰胺的测定。而采用庚烷磺酸钠作为离子对试剂，奶粉中杂质出峰在三聚氰胺之后，可能影响分离。另外，采用其他色谱柱不一定能够*分离三聚氰胺和干扰物质。

方法如下：

1. 标准样品配置：

称取100mg的三聚氰胺标准品，用甲醇溶液融解并定容于100mL容量瓶中，该溶液浓度为1mg/mL。使用时，用HPLC流动相稀释至所需浓度。

2. 提取：

称取5mL（固体样品2g）试样，准备加入9mL 流动相，加入1mL乙酸铅溶液。摇匀，40-50℃下超声提取20min。静止2min，取上层提取液约10mL转入离心管，在10000r/min离心机离心5min。

3. SPE小柱净化：

分别用3mL甲醇，3mL水活化Anpelclean^TM MCX混合型阳离子交换萃取柱，准确移取3mL标准品/样品溶液（固体样品则为2ML样品溶液/标准品溶液）上柱，控制过柱速度在1mL/min以内（或按样品重力过柱）。再用3mL 0.1M盐酸，3mL甲醇洗涤，抽近干（或按溶剂重力滴干）后用5mL 5％氨水甲醇溶液洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，准确加入流动相1mL，40-50℃下超声溶解后过0.22或0.45µm滤膜，上机测定。

4. 液相色谱条件：

色谱柱：CNW C18柱

流动相：称取2.02g己烷磺酸钠（或庚烷磺酸钠）和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。取该溶液900mL加入100mL乙腈。

柱温：40℃。

流动相流速：1.0mL/min。

检测波长：240nm。